【摘要】  目的通过检测血清睾酮、皮质醇、血乳酸和尿素氮含量的变化，评价北虫草提取物促进机体运动性疲劳恢复的生物学作用。　　方法以人体为研究对象，每个实验分2组，对照组和给药试验组，根据性别又分为男和女两组，男性48人，女性35人。血清睾酮、皮质醇含量测定采用放射免疫分析法，血乳酸和尿素氮含量测定分别采用乳酸分析仪与二乙酰-肟检测法。结果男性血清睾酮含量实验组(863.54 ± 231.57)明显高于对照组(681.02 ± 157.12) fmol/L，皮质醇含量实验组 (20.20 ± 2.66) 低于对照组(26.38± 6.42) nmol/L , 差异有显著性(P<0.01)。女性血清皮质醇含量实验组(21.04 ± 3.71)低于对照组(26.84 ± 5.06)nmol/L , 差异有显著性(P<0.05)。男性血乳酸和尿素氮含量实验组为(0.93 ± 0.23)和 (10.27 ± 1.89)mmol/L ,明显低于对照组(1.88 ± 0.33)和(14.77 ± 1.21)mmol/L,尿素氮差异有显著性(P<0.05)。结论北虫草提取物具有预防疲劳促进机体运动性疲劳恢复的作用。

【关键词】  北虫草;运动性疲劳;放射免疫

　Abstract：ObjectiveTo study the effects of Cordyceps militaris extract on the promoting motion fatigue recover on human by determining serum testosterone, cortisol, lactic acid and urea nitrogen contents.MethodsSeparately forty-eight man and thirty-five women were divided into two groups, including matched group and administration experimental drug group. Serum testosterone and cortisol contents were determined by radioimmunoassay kit(RIA kit). Lactic acid and urea nitrogen contents were determined by YSI1500 Lacte Analyzers and Diacetyl Monoxime method.ResultsSerum testosterone and cortisol content in blood experimental drug group were(863.54 ± 231.57) fmol/L and (20.20 ± 2.66) nmol/L,(680.02 ± 157.12) fmol/L and (26.38± 6.42) nmol/L in male of matched group.Serum testosterone content in experimental drug group was obviously than that of matched group , cortisol content was lower than that of matched group, and there was statistical significance (P<0.01) between the drug groups. The levels of serum testostenme experimental group and watched group were(21.04 ± 3.71)nmol/L, and(26.84 ± 5.06)nmol/L in female respectively, cortisol content was lower than that of matched group, and there was statistical significance (P<0.05) as compared with matched group.The contents of lacic aevle and area lltrogea in experimental drug group and watches group were(0.93 ± 0.23)and(10.27 ± 1.89)mmol/L,(1.88 ± 0.33)and(14.77 ± 1.21)mmol/L in male respectively, lactic acid and urea nitrogen was obviously lower than those of matched group, and there was statistical significance (P<0.05) compared with matched group.ConclusionThe Cordyceps Militaris extract has anti-fatigue effect and bioactivity of promoting motion fatigue recover in human.护理论文发表

　　Key words：Cordyceps militaris;Motility fatigue;Radioimmunoassay kit.

　　本课题在小鼠实验的基础上，进一步展开了北虫草提取物对促进人体运动性疲劳恢复的实验研究。许多研究表明，运动性疲劳是由于机体运动所引起的“机体生理过程不能持续其功能在特定水平上和/或不能维持预定的运动强度”的机体运动能力下降的现象[1]。在运动中因能量消耗，代谢紊乱，肌肉力量下降和中枢神经系统兴奋性或活动性丧失，致使运动性疲劳发生的机制表现出异常的复杂。尽管生命科学的飞速发展，组织、细胞和分子等微观研究领域的技术手段层出不穷，但有关延缓疲劳，消除疲劳和促进疲劳恢复的措施和方法，仍未取得令人满意的效果，有些药物因含有兴奋剂，其毒副作用使机体不能耐受，甚至危害生命安全。北虫草作为中国传统天然产品有得天独厚的优势，本研究在动物实验中已经观察到，它能延长雄性小鼠低温力竭性游泳与耐缺氧时间，使血清睾酮含量提高。有关北虫草子实体和菌丝提高机体免疫力，抗疲劳，提高生理机能的作用已有文献报道[2]，但本文针对天赢北虫草提取物对促进人体运动性疲劳恢复的影响，尚未见报道。探讨天赢北虫草提取物抗运动性疲劳的机制变化，对部队官兵在紧张的体能训练，军事抢险应激中，促进身体疲劳的恢复具有重要的军事意义。

　　1材料与仪器

　　1.1对象与分组辽宁体校学员，其中男48人，平均年龄17~26岁。女35人，平均年龄16~25岁;分为男女对照组与男女实验组共4组，训练时间为2~8年。

　　1.2虫草提取物与仪器虫草提取物，剂型为片剂，含量0.15g/片,沈阳中天生物工程有限公司提供[批准文号：卫食健字(1998)第322号，执行标准：Q/ZT.J02-01-1997]。肝素购自Sigma公司，EDTA、氢氧化钠、氯化钠等购自沈阳化学试剂公司。睾酮放射免疫分析试剂盒购自北京北方生物技术研究所，二甲苯、PPO、POPOP、HCI、NaOH等均为分析纯。J2-21低温离心机：[美国Beckman公司 离心半径：13.5cm，离心力计算：RCF=(1.118×10-5)(r/min)2]。LKB1211液闪仪(瑞典LKB公司 机效50%)。Kontro-28D γ计数仪(瑞士Kontro公司)。XMTD-0363型电子恒温水浴锅(中国天津 泰斯特仪器有限公司);78-1型磁力加热搅拌器(中国杭州仪表电机厂) TD6001B型电子天平(中国 余姚市金诺天平仪器有限公司); YSI1500型乳酸分析仪(美国YSI公司)。日立 7020型全血生化分析仪(日本 日立公司)。

　　1.3虫草原料天赢北虫草(Cordyceps militaris)子实体由沈阳中天生物工程有限公司李春燕教授惠增，子实体药号：国家食品药品监督管理局审批的人工北虫草药材研究(批件号2003L01393、药物临床研究号2003L01394)。

　　2方法

　　2.1用药方法与血样的制备采用单盲法，用药组服用剂量为2.25 g/d，分3次口服，0.75g/次，连续服药时间60 d。于清晨6时空腹安静时采取肘部静脉血，对照组为安慰剂。肝素抗凝，2 000 r/min, 离心，分离血清，置-20℃保存，备用于检测血清睾酮、皮质醇、乳酸和尿素氮。

　　2.2血清睾酮和皮质醇的放免测定取冻存血清50 μl，平行双管加样，具体实验操作方法按试剂盒说明书提供的方法进行。单位fmol/L与nmol/L[3，4]。

　　2.3血乳酸的测定 采用YSI1500型乳酸分析仪，具体操作方法按仪器说明书进行。单位：mmol/L [5]。

　　2.4尿素氮的测定 二乙酰-肟法[6]，原理：血液和尿中的尿素在强酸条件下与二乙酰肟(Diacetylmonoxim)和硫氨尿(Thio-Semicarbazixe)共煮，生成红色复合物, 颜色深浅与尿素氮含量成正比关系, 与同样处理的尿素标准管比较，可求出其含量。具体操作方法分别在空白管、标准管、测定管A和测定管B按顺序加入各种试剂(见表1)。混匀，然后置沸水锅中准确计时煮沸10 min，置流水中冷3 min后比色，用520 nm波长比色，以空白管调零。单位：mmol/L。

　　2.5统计学处理方法数据处理采用SPSS14.0软件包完成统计分析，实验数据用±s表示，组间比较采用t检验，显著性以P<0.05或P<0.01表示。表1血清尿素氮测定时各管试剂加样顺序

　3结果

　　3.1血清睾酮和皮质醇的放免测定结果见表2~3。男性实验组血清睾酮含量明显高于对照组，皮质醇含量明显低于对照组，差异有显著性(P<0.01)。女性实验组血清睾酮含量与对照组比较略有增加，但差异无显著性(P>0.05)，皮质醇含量低于对照组，差异有显著性(P<0.05)。护理论文发表

　　3.2血乳酸和尿素氮的测定结果见表2~3。与对照组比较，男性实验组血乳酸和尿素氮含量低于对照组，尿素氮与对照组比较，差异性显著(P<0.05)。女性实验组尿素氮含量高于对照组，差异性不显著(P>0.05)。女性实验组的血乳酸含量与对照组比较，无明显差异(P>0.05)。表2男性血清睾酮、皮质醇、乳酸和尿素氮含量测定结果表3女性血清睾酮、皮质醇、乳酸和尿素氮含量测定结果

　　4讨论

　　本文实验结果表明，在不改变训练强度和正常生活情况下，经服用天赢北虫草子实体提取物能使男性运动员血清睾酮含量明显提高，皮质醇降低。女性运动员血清睾酮含量增加不明显，皮质醇降低明显。这种实验结果说明体内蛋白质合成代谢优于分解代谢，机体内环境平衡处于占主导地位的过程，体能代偿恢复得好，机体体内睾酮/皮质醇比值存在着一种平衡协调关系，比值过低，是疲劳不能恢复的原因，只有血睾酮呈较高水平，才能促进蛋白质的合成，红细胞生成增加，携氧活跃，加快疲劳的恢复，促使肌肉发达，力量和耐力增强。血乳酸的产生是机体供氧不能满足能量要求，加速糖酵解的供能过程，乳酸的大量堆积使肌肉内H+离子浓度升高，肌肉酸痛疲劳。有研究报道北虫草具有增加Hb含量提升携氧能力[7]，因此可以帮助机体清除乳酸有利于促进疲劳的恢复。尿素氮是蛋白质和氨基酸代谢的终产物，当机体体能大量消耗时，蛋白质的分解代谢增强，蛋白质在分解释放出的支链氨基酸会通过“葡萄糖-支链氨基酸-丙氨酸循环”，在丙氨酸提供能量的同时，脱下氨转变为尿素，而使血清尿素氮的含量升高。本研究中北虫草实验组出现机体适应能力加强的总趋势，具体表现为尿素氮的含量降低，虽然女性实验组略有升高但无显著性意义，分析女性实验组尿素氮升高的原因，可能与实验过程条件控制以及分组内存在着个体差异有关，尚需重复实验，以获得确切的结论。北虫草含有丰富的蛋白质和氨基酸，在体能消耗的过程中具有改善线粒体ATP酶-钠泵和红细胞变形能力作用，并呈剂量-依赖关系[8]。

　　总之，有关运动性疲劳的机理和促进恢复的研究，一直是困扰部队训练和军事应激中倍受关注和迫切要解决的问题。本文研究的北虫草含有大量的营养物质和核酸衍生物，提供了维持机体氮平衡的氨基酸，及在骨骼肌中代谢的支链氨基酸，还有物质代谢的维生素和微量元素，尤其是核酸衍生物提供了能量体系输出的ATP和磷酸肌酸，它改善了肌肉的营养，补充了能量物质的耗竭，清除了代谢产物的堆积，调节了机体内环境的平衡，促进了机体疲劳的恢复过程。

【参考文献】
  　[1] 曲绵域，高云秋，浦浚宗，等.实用运动医学[M].北京：北京科学技术出版社，1995：52.

　　[2]陈俐彤，曹红峰，黄文芳.蛹虫草虫草的化学成分、药效及应用[J].现代食品科技，2005,21(3)：1921.

　　[3]杨国平，吴益民，王洪军，等. IL-1对冷应激大鼠睾丸间质细胞睾酮浓度的调节[J].解放军预防医学杂志，2007，25(5)：336.

　　[4]王洪军，冯立，禇征，等. 人参多糖对冷应激大鼠睾丸雄激素受体mRNA表达及血浆睾酮的影响[J].时珍国医国药，2008,19(4):929.

　　[5]中国卫生部·保健食品检验与评价技术规范[M].北京：中华人民共和国卫生部卫生法规与监督司，2003：87.

　　[6]叶庄妩.全国临床操作检验流程，第2版[M].南京：南京大学出版社，1996：262.

　　[7]屈红林.复方中药抗疲劳液对小鼠和田径运动员抗疲劳效果的实验研究[J].时珍国医国药，2008,19(3):697.

　　[8]郭海平，杨智敏. 冬虫夏草药理作用研究进展[J].中草药，1999，30(3)：231.护理论文发表