【摘要】  目的 观察牡丹皮有效成分丹皮酚和芍药苷配伍对实验犬心肌缺血及心肌梗死的影响。方法 结扎冠状动脉前降支造成犬急性心肌梗死模型。采用心外膜电图标测心肌缺血范围及程度,定量组织学(N-BT染色法)测定心肌梗死范围。结果 丹皮酚、芍药苷各配伍组均能减轻缺血程度和降低缺血范围,并缩小心肌梗死面积,其作用优于牡丹皮组,且可明显改善犬急性心肌缺血程度(P＜0.05或P＜0.01),明显减少经N-BT染色所显示的心肌梗死区(P＜0.01)。结论 牡丹皮有效成分丹皮酚和芍药苷重组复方对心肌缺血具有良好保护作用。

【关键词】  牡丹皮；丹皮酚；芍药苷；心肌梗死；犬

　　Abstract：Objectives To study the effects of effective constituent of Cortex Moutan - Paeonol and Paeoniflorin on myocardial ischemia and myocardial infarction in experimental canines. Methods The coronary artery ligation was employed to establish the model of canines with acute myocardial ischemia and myocardial infarction. The extent of myocardial ischemia was detected by epicardial-electrocardiogram and the extent of infarction was determined by N-BT staining method. Results The adminstration of Paeonol and Paeoniflorin reduced the myocardial ischemia level (P＜0.05 or P＜0.01). The adminstration of Paeonol and Paeoniflorin reduced the infarction range marked by N-BT staining method (P＜0.01). The effects were superior than Cortex Moutan. Conclusions The effective constituent of Cortex Moutan - Paeonol and Paeoniflorin reassociated complex prescription has good effect of protecting myocardial ischemia.

　　Key words：Cortex Moutan；Paeonol；Paeoniflorinl；myocardial infarction；canine

　　牡丹皮始载于《神农本草经》,列为中品,为毛茛科多年生落叶小灌木植物牡丹Paeonia suffruticosa Andr.的干燥根皮。牡丹皮在化学和药理方面的研究直到20世纪50年代才有了较大进展,研究逐步深入,从中分离出大量的化合物,并且进行了药效学、代谢及毒理学研究,为牡丹皮的临床药效和安全用药提供了有力的依据[1]。丹皮酚(Paeonol)和芍药苷(Paeoniflorin)是牡丹皮中主要的药效成分,药理活性广泛,尤其在心血管疾病的治疗方面,二者均显示出良好的临床疗效。本实验采用成年健康比格犬,观察丹皮酚和芍药苷配伍对结扎犬冠状动脉前降支造成急性心肌梗死的影响,期望为二者配伍的临床应用提供理论依据。

　　1  实验材料

　　1.1  动物

　　成年健康比格犬,雌雄兼用,体重10～13 kg,25只,中国人民解放军军事医学科学院,许可证编号：SCXK-(军)2007-004。

　　1.2  药物

　　丹皮酚(98.9%),常州神马药业有限公司生产,批号20070424。芍药苷(98.9%),常州神马药业有限公司生产,批号20070523。牡丹皮,购自北京同仁堂药店崇文门分店,批号20090426。

　　1.3  试剂

　　戊巴比妥纳,Sigma产品,批号P3761-25 g。氯化硝基四氮唑蓝(nitro blue terazolium chloride,N-BT),国药集团化学试剂有限公司,批号F20060725。盐酸利多卡因注射液,北京益民药业有限公司,批号20071229。肝素钠注射液,上海市第一生化药业有限公司生产,批号070702。盐酸地尔硫卓(合心爽),天津田边制药有限公司生产,批号0808050。1.4  主要仪器

　　多道生理记录仪：MP-100型,美国BIOPAC。电动人工呼吸机：SC-3型,上海医疗设备厂。全自动γ计数仪,SN-6110型,上海核所日环光电仪器有限公司。医学图像分析系统,HPIAS- 1000型,北京科海公司。高频电刀,DGD-300C-2型,北京贝林电子有限公司。

　　2  实验方法

　　2.1  造模和分组

　　将比格犬25只随机分为5组,每组5只。即模型组、阳性对照药组(合心爽组)、牡丹皮组、丹皮酚＋芍药苷A组(丹芍A组)、丹皮酚＋芍药苷B组(丹芍B组)。以3%戊巴比妥钠30 mg/kg静注麻醉。背位固定,颈部皮肤切开,气管插管,连接电动动物呼吸机,分离冠状动脉左前降支中下1/3处,穿线结扎,造成心肌梗死,标测心外膜心电图,施十二指肠术以备给药。手术完毕后,稳定15 min,记录各点心电图,同时自股静脉取血,作为给药前值,结扎冠状动脉15 min后,经十二指肠给药。

　　2.2  给药

　　模型组给予生理盐水；合心爽组给予盐酸地尔硫卓6 mg/kg；牡丹皮组给予牡丹皮水煎液370 mg原药材/kg；丹芍A组按30、7.5 mg/kg剂量给予丹皮酚、芍药苷；丹芍B组按15、3.75 mg/kg剂量给予丹皮酚、芍药苷。

　　2.3  观察指标

　　2.3.1  计算心肌缺血程度  记录正常、给药前、给药后15、30、45、60、90、120、180 min 心电图,以S-T段升高大于2 mV为判断标准,计算心肌缺血程度(S-T段升高总毫伏数,为∑-ST)。

　　2.3.2  计算心肌梗死面积  180 min后,取下心脏,全心称重。将左心室均匀地横断切成5片,置于N-BT染色液中常温避光染色15 min,扫描染色后的切片。HPIAS-1000型医学图像分析系统测量每片心肌双侧的梗死区(即N-BT非染色区)与非梗死区(N-BT染色区)。计算每片心肌的面积、心室总面积和梗死区总面积以及梗死区占心室面积以及占全心面积的百分比。

　　3  统计学方法

　　以药前值作为100%,以不同观察时间的实测值与药前比值为分析对象。所有数据均以x±s表示。采用Levene’s test检验数据的方差齐性,方差齐则采用One-Way ANOVA(单因素方差分析)法进行多组间比较,若多组间比较有显著性差异,则采用LSD检验进行组间两两比较。方差不齐则采用Tamhane’sT2检验。P＜0.05为有统计学意义。

　　4  结果(见表1、表2)

       表1各组犬心肌缺血程度(∑-ST)比较(略)注：与模型组比较,*P＜0.05,**P＜0.01(下同)表2牡丹皮有效成分重组复方对犬心肌缺血面积的影响(略)

　　5  讨论

　　目前研究抗心肌缺血的方法很多,但都有一定的局限性,因此,常采用多种方法多指标的综合研究。在结扎冠状动脉左前降支所导致犬急性心肌缺血的早期,利用心外膜电图标测ST段变化,能表明心肌血量的供应状态[2]。缩小心肌梗死面积也已作为抗心肌缺血药物的主要疗效指标[3]。本实验在既往马氏等[4]研究牡丹皮对体外培养乳鼠心肌细胞动作电位影响的实验基础之上,采用治疗性给药,使用30个点的心外膜电极来测定ST段的变化。应用定量组织学(N-BT染色法)测定心肌梗死范围,观察药物对心肌缺血的保护作用。结果显示,急性心肌梗死后,与模型组比较,丹皮酚、芍药苷配伍组均能减轻缺血程度和降低缺血范围,并缩小心肌梗死面积,其作用优于牡丹皮组,提示牡丹皮有效成分丹皮酚和芍药苷配伍对心肌缺血具有良好保护作用。

【参考文献】
  　1 王祝举,唐力英,赫 炎.牡丹皮的化学成分和药理作用[J].国外医学·植物药分册,2006,21(4)：155－159.

　　2 Eugene Brauwald, Peter R Maroko. ZT-Sdgment mapping：Recalistic and unrealistic expectation[J]. Circulation Ras,1976,54(4)：529.

　　3 睢大员,陈满秋,于晓风,等.人参Rb组皂苷对犬实验性心肌梗死的保护作用[J].中草药,2001,32(2)：138.

　　4 马玉玲,李连达,李文彬,等.牡丹皮及奎尼丁对体外培养乳鼠心肌细胞动作电位的影响[J].中西医结合杂志,1986,6(5)：229－293.