解脲支原体（UU）是人类的一种重要病原微生物，是感染泌尿生殖道，口腔，直肠和眼结膜表面的专性细胞内寄生物。UU既可导致性传播疾病，又可引起女性盆腔炎，肾盂肾炎等疾病，对女性不孕不育及通过血液感染新生儿也有必然的联系。目前UU的检测有金标法，酶联免疫法 ，培养法等。随着科技的发展，PCR法用基因扩增法进行检测UU，是扩增产物经核酸探针特异检测技术。
LCR法是依赖靶核酸序列的寡核苷酸探针的连接技术。我们对临床232例标本用PCR 和LCR进行UU的检测，在此对检测结果进行一些比较分析。
1 材料和方法
1.1 标本来源 全部标本来源于本院2010年12月—2011年3月泌尿生殖门诊232例患者，有不同程度的泌尿生殖感染症状，临床怀疑为UU感染。
1.2 试剂及仪器 PCR法试剂采用上海万达生物工程有限公司的PCR液相杂交试剂盒。LCR法试剂采用的是美国Abbot公司提供的UU诊断试剂盒。PCR与LCR的扩增仪均为Abboot LCx Thermal Cycler ,测定仪为Abboot LCx@R Analyzer .
2 方法
2.1 标本采集 按照常规方法采集男性尿道和女性宫颈拭子放置于含1.5毫升标本保存液的试剂管中立即送检，
2.2 LCR检测 严格按照美国Abbot公司提供的UU诊断试剂盒说明进行操作，扩增条件：温度90度，加热300秒进行循环。循环参数：变性：97度，30秒 。退火55度，30秒，延伸62度60秒，40次循环。
2.3 PCR检测 严格按照上海万达生物工程有限公司的PCR液相杂交试剂盒的说明进行操作，扩增条件：温度95度，加热450秒进行循环，循环参数：变性：97度，60秒 ，退火60度，90秒，延伸65度80秒，60次循环
2.4 认证实验 根据扩大金标准，LCR阳性为阳性，PCR阴性，PCR阳性时，应补充用直接荧光抗体实验确认。
3 结果
用LCR检测的患者标本中，阳性标本率为29%。 PCR检测的标本中阳性率为23% ，测定结果见表：
(X2=30.5 P<0.05) 注意 部分标本同时做了直接荧光抗体实验确认 结果显示：LCR与PCR法相比较，X2=30.5 P〈0.05 ，两者有明显的差异性，LCR明显优于PCR，LCR 在检测男性尿道和女性宫颈拭子的UU中，敏感性，特异性均高于PCR。
4 讨论
快速，准确的检测UU是临床检测不断寻求的方法，以往常用的金标法，酶联免疫法 ，培养法等，误差大，干扰因素多，结果不准确，反应不灵敏。而以往的标本用尿液检测，因为标本的不确定性，保存的不符合检测使用，在检测的过程中容易被污染，其他干扰因素的加大，更是造成了检验结果的不确定，同时尿液标本的UU含量较少，也不利于检测。而男性尿道和女性宫颈拭子的UU来自病变的接触部位，污染少，而且来自其他部位的污染细菌少，结果更为直接，明确。但是不利的方面是带给患者的损伤和心理有一定的痛苦。本实验结果证明，LCR具有更高的灵敏性和特异性。
LCR是在连接酶扩增反应中，引入热稳定的DNA连接酶而建立的，类似PCR的新技术。LCR与PCR不同，它应用四种寡核苷酸探针，以达到高度敏感性和特异性，反应检测时间也比PCR短而且能够进行自动检测而PCR无此功能，LCR与PCR检测UU相比具有以下优点，（1），快速，经济，检测标本量大，（2）灵敏度高，漏诊率低，适合检测各种发病人群，包括早期感染者，和无症状的病原携带者。（3）重复性好，操作与检验人员的经验等主观因素无关。（4）特异性高，只要引物设计合理，严格操作程序，避免积累性污染，假阳性可以避免的。
总之，用男性尿道和女性宫颈拭子为标本的LCR实验是一种适用的，灵敏的，快速的诊断实验。在检测泌尿生殖感染中有着重要的临床意义。
参考文献
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