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【摘要】  目的 探讨金标法以及TRUST滴度法检测梅毒螺旋体的效果。方法 采用酶联免疫吸附试验,甲苯胺红滴度法(TRUST)对147例临床样本进行初级筛选试验,并对初筛结果阳性的49例血清进行金标法梅以及毒螺旋体检验。结果 酶联免疫吸附试验滴度法(TRUST)试验阳性的49例样本中,金标法阳性46例,二者的符合率为93.88%。结论 金标法与(TRUST)滴度法其灵敏度、特异性无显著性差异(P>0.05),可以联合应用于临床中梅毒的检测,提高检出率。 

【关键词】  梅毒 ; 抗体 ; 金标法 ; 滴度法
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金标法与滴度法应用于临床检测梅毒的效果观察
2011-04-08 09:26:57 来源:学术论文网 作者:徐正红 【 】 浏览:115次 评论:0

【摘要】  目的 探讨金标法以及TRUST滴度法检测梅毒螺旋体的效果。方法 采用酶联免疫吸附试验,甲苯胺红滴度法(TRUST)对147例临床样本进行初级筛选试验,并对初筛结果阳性的49例血清进行金标法梅以及毒螺旋体检验。结果 酶联免疫吸附试验滴度法(TRUST)试验阳性的49例样本中,金标法阳性46例,二者的符合率为93.88%。结论 金标法与(TRUST)滴度法其灵敏度、特异性无显著性差异(P>0.05),可以联合应用于临床中梅毒的检测,提高检出率。

【关键词】  梅毒 ; 抗体 ; 金标法 ; 滴度法

大量的临床资料以及有关的流行病学调查结果显示,在我国梅毒的发病率有逐年上升的趋势[1~2]。因此,开发出一种简便的、快速的同时具有较高灵敏度及特异性的检查方法,对于该种疾病的预防、治疗以及筛查大量的献血者无疑具有十分重要的意义。对筛查者进行血清学检测是诊断梅毒的重要依据之一,在梅毒的诊断、治疗以及研究上具有非常重要的意义。因此,本院将金标法,TRUST滴度法分别应用于对梅毒的检测,由于TPPA是公认的比较好的梅毒抗体的确认方法,因此分别对样本进行检测,在以TPPA结果进行对比,观察其结果的一致性,现将分析报道如下。

  1 资料与方法

  1.1 一般资料

  本组标本选择作者单位2006年4月以来143例,先对临床样本进行初级筛选试验,再对初筛结果呈阳性的49例血清,进行金标法以及梅毒螺旋体检验。其中男性26例,女性23例,年龄18~78岁,平均年龄(48±26.5)岁。教师发表论文

  1.2 检测试剂

  甲苯胺红TRUST试剂(上海荣盛生物工程有限公司。批号20010301);金标法试剂(上海科华生物。批号:200110225);TPPA试剂(上海实业科华生物技术有限公司。批号:200110201)

  1.3 方法

  梅毒螺旋抗体检测:采集上述的试剂盒中所要求的血清(浆)样本,并且按照试剂盒的说明分别进行检测。

  1.4 统计学方法

  采用SPSS15.0统计学软件进行统计学分析。配对计数资料采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。

  2 结 果

  根据相关文献,TPPA是公认的较好的梅毒抗体确认方法,以其结果为标准。其中,采用金标法试剂的假阳性率为4.00%(2/50),假阴性率为12.40%(12/97);TRUST滴度法试剂的假阳性率为6.25%(3/48),假阴性率为35.05%(34/99)。TRUST滴度法和金标法之间在假阳性之间无明显的区别(χ2值分别为0.43,0.41,P>0.05),TRUST滴度法的假阴性率明显高于金标法(7.08,6.97,P<0.01)。表1 金标法和TRUST滴度法阳性例数比较

3 讨 论

  梅毒螺旋体检测,以此明确患者受血前或术前的情况,是如今医学发展的必经步骤,是新的《医疗事故处理条例》实行举证责任倒置的参照。在传染性指标的检测中,选择初筛试验时,试验的灵敏度很重要,敏感性差的,易出现漏检,不适合筛选献血者及输血前患者各传染性指标的检测 。

  梅毒螺旋体侵入机体后产生两种抗体:为心磷脂抗体及抗密螺旋体抗体,检测前者的方法,目前,在国内最为常用的是RPR和TRUST滴度法,且长期以来成为筛查检测献血者的主要方法。机体感染梅毒螺旋体后,产生特异性抗螺旋体抗体(TPAb)及非特异性的抗类脂质抗体。梅毒特异性抗体出现早、消失慢,即使经正规的抗梅毒治疗,仍然检出了特异性抗体,甚至可终生检出[3]。据文献[4]报道,人体感染梅毒螺旋体后,血清中产生的抗螺旋体抗体相对与抗类脂质抗体早[5]。

  胶体金免疫层析法即金标法,是近几年发展起来的继三大标志免疫检测之后一种新的免疫检测技术[6]。该试验的原理是将各种试剂逐一固定在同一张试纸条上,检测标本列于试纸条的一端,一种试剂溶解后,通过毛细血管作用移动,与条上另外的试剂接触发生反应,像层析一样[7]。

  TPPA检测血清中的梅毒螺旋体抗体,特异性好、灵敏度高,已是目前公认的检测梅毒血清试验方法;但因试剂较贵,检测用时较长。金标法,采用了纯化重组基因的梅毒抗原,胶体金作为其指示标记,硝酸纤维素膜上进行反应,双抗原夹心法原理为基础,快速定性的检测人血清(血浆)中的梅毒螺旋体特异性抗体,其特异性、灵敏度与 TPPA相近,符合率为93.88%(46/49),从而替代TPPA作为快速梅毒血清确证试验。但是血清(血浆)中特异性梅毒螺旋体抗体浓度过低时,梅毒螺旋体抗体胶体金法会产生假阴性反应,这就需要与TPPA方法结合,再进行综合的判断。

  本实验结果显示,金标法其特异性和TPPA相比无显著差异,且明显好于TRUST法。TRUST滴度法和金标法之间在假阳性之间无明显的区别,但是TRUST滴度法的假阴性率明显高于金标法,由于金标法检测在老年患者中存在较高的假阳性率,因此在初筛试验阳性时,必须进一步选择TRUST试验并结合临床进行综合分析,才能做出准确诊断。金标法试剂成本低,符号显示结果明确,操作简便,可分批或单人份检测,结果易保存。因此,采用灵敏特异的梅毒螺旋体抗体诊断金标法可以完全与TRUST滴度法相互替代。作为大批量标本梅毒筛查的理想方法,又可以作为诊断试验。

【参考文献】
    [1] 梁庆华.3种方法联合检测在老年梅毒诊断中的应用价值[J].检验医学与临床,2009,6(7):498~499.

  [2] 秦红群,马顺高.梅毒螺旋体抗体筛查实验的选择[J].中国现代医生,2008,46(28):146~147.

  [3] Lambert NL,Fisher M, Imrie J,et al. Communith based syphilis screening: feasibility,acceptalility, and effectiveness in case finding[J].Sex Transm Infect JT-Sexually Transmitted Infections,2005,81(3):213~216.

  [4] Imrie J,Lambert N, Mercer CH,et al. Refocusing health promotion for syphilis prevention:results of a case-control study of men who have sex with men on England's south coast[J].Sex Transm Infect JT-Sexually transmitted infections,2006,82(1):80~83.

  [5] 朱学骏.现代皮肤病性病诊疗手册[M].第2版.北京:北京医科大学出版社,2001:319~321.

  [6] 信红霞,王成英,李永海,等.联合筛查无偿献血者HbsAg/Tp金标试纸的应用评价[J].黑龙江医药科学,2008,31(5):69.

  [7] 李从凤.梅毒螺旋体两种检测方法的比较[J].检验医学与临床,2010,7(4):355~356.教师发表论文

 

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